磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法

產品規格：50管/48樣

檢測方法：可見分光光度法

產品貨號：BK-01S6658

產品分類：脂肪酸代謝系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH5.5   Citrate Buffer,0.5M,pH5.5   常溫保存

100次 超快非醇核酸沉淀劑 Magic Solution DNABACK 4℃保存

2 ug pGL4.26 pGL4.26 低溫運輸，-20℃保存

伊紅美藍瓊脂培養基（Levine） Levine EosinMethylene Blue Agar Medium 250g

1瓶 HCT-8/FU細胞株 HCT-8/FU 低溫運輸和保存

乳糖蛋白胨培養液（含小倒管） Lactose Peptone Broth 10ml*20支/包

250U T7核酸內切 I T7 Endonuclease Ⅰ     -20℃保存

1mL RNA Loading Buffer,6X  RNA Loading Buffer,6X  常溫保存

1 管 E2566大腸桿菌 ER2529 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRevTRE pRevTRE 低溫運輸，-20℃保存

創傷弧菌成套生化鑒定管  9種*2套/盒*5盒

磷脂酶C(PLC)測試盒可見分光光度法Rabbit anti-MG IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的兔抗爪沙鼠IgG 規格: 0.1ml

Phospho-VASP(Ser239)  磷酸化管擴張刺激磷蛋白抗體 規格: 0.1ml

Phospho-PAR4 (Thr163)  磷酸化蛋白活化受體4抗體 規格: 0.1ml

TGF beta 3  轉移生因子β3（TGFβ3）抗體 規格: 0.1ml

VILIP1  神經視錐蛋白樣1抗體(神經鈣蛋白) 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-Monkey IgG  兔抗猴IgG 規格: 1mg

FIGNL1  FIGNL1蛋白抗體 規格: 0.2ml

Rabbit Anti-Goat IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗羊IgM 規格: 0.1ml

phospho-Tau protein(Thr231)  磷酸化微管相關蛋白抗體 規格: 0.1ml

RAB40C  RAS基因家族蛋白RAB40C抗體 規格: 0.2mlphospho-STAT5a(Ser726)  磷酸化信號轉導和轉錄激活因子5a抗體 規格: 0.1ml

APOD  載脂蛋白D抗體 規格: 0.2mlNectin 4  毒受體相關蛋白4抗體 規格: 0.2ml

MSF/Cell division control protein septin D1  細胞周期調控蛋白D1抗體 規格: 0.2mlDNA Ligase IV/LIG4  DNA連接4抗體 0.2ml